皮诺飞生物Western Blot实验送样单
客户姓名 | 送检日期 | ||||||
单位名称 | 联系电话 | ||||||
样品物种名称 | （拉丁名）: | ||||||
样品类型及数量 | ☐细胞 ☐蛋白 ☐组织 样品个数： | ||||||
样品提取种类 | ☐总蛋白 ☐膜蛋白 ☐核蛋白 ☐质蛋白 | ||||||
样品类型 | (如 心/肝/脾/肺/叶片…) | ||||||
已知实验数据及结果 | |||||||
请您确认所寄样品无致病性，请签名:__________________________ | |||||||
NO. | 样品编号 | 数量 | 标本量/体积 | NO. | 样品编号 | 数量 | 标本量/体积 |
1 | 14 | ||||||
2 | 15 | ||||||
3 | 16 | ||||||
4 | 17 | ||||||
5 | 18 | ||||||
6 | 19 | ||||||
7 | 20 | ||||||
8 | 21 | ||||||
9 | 22 | ||||||
10 | 23 | ||||||
11 | 24 | ||||||
12 | 25 | ||||||
13 | 26 | ||||||
★样品备注：
★剩余样品是否需要返还： £是 £否 保存期限：3个月
1.胶版排列形式：
上样顺序---从左到右：（请准确填写清楚每张膜的上样顺序）
★需要多块时请附上EXCEL表格。
10孔泳道
10孔胶 | 泳道 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | |||||
样品编号 | Marker | |||||||||||||||
11孔胶 | 泳道 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | ||||
样品编号 | Marker | |||||||||||||||
15孔胶 | 泳道 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 |
样品编号 | Marker |
注：胶片条带没有marker,全膜带marker有特殊要求请备注：
请在您要做的选择上打个对号（√）（必填）
常用选择：条带（ ）、全膜（ ）
注：一张全膜一个指标，内参单独跑一张全模，有特殊要求提前沟通
(2)请在您要做的内参上打个对号（√）（必填）
常用内参选择：GAPDH（ ）、B-actin（ ） 其他：___________
2、检测指标信息
NO. | 抗体名称 | 货号 | 体积 | 稀释比例 | 分子量 | 来源 | 厂家 | 保存温度 |
1 | ||||||||
2 | ||||||||
3 | ||||||||
4 |
实验信息已全部填写清楚，无其他特殊要求。
客户签名:
取样人签字:
验收人签字:
Western Blotting 样品采集指南
蛋白实验（比如 WB、IP、Co-IP 等）
贴壁细胞：所需细胞数≥ 1×107
从培养箱中取出贴壁培养细胞，显微镜下观察细胞，确定生长状态良好；
第一种方法
A.弃去培养基，向细胞培养瓶或培养皿中加入 5 ml 无菌 PBS，洗一次；
B.用胰酶消化细胞，观察细胞消化状态，（细胞脱离培养板）
C.将胰酶消化液（含消化下来的细胞）转移至1.5离心管中，1200r/min,10min低速离心，弃去胰酶消化液；（保留细胞沉淀）
D. 加入 1ml PBS ，1200r/min,10min离心沉淀细胞，弃去 PBS（一定要吸净）；先两次。
E.置于-80°C 或液氮中长期保存；
F.运输方式：干冰。
第二种方法
A.弃去培养基，向细胞培养瓶或培养皿中加入 5 ml 无菌 PBS，洗一次，里面液体吸干净；
B.把胞培养瓶或培养皿用封口膜包装完整
C.置于-80°C 或液氮中长期保存；
D. 运输方式：干冰。
悬浮细胞：所需细胞数≥ 1×107
A.确定细胞生长状态良好；
B.转移至离心管中，低速离心收集得到细胞沉淀，弃去培养液；
C.加入 5 ml PBS ，低速离心沉淀细胞，弃去 PBS（一定要吸净）；
D.置于-80°C 或液氮中长期保存；
E.运输方式：干冰。
组织样品
A.取下新鲜组织 ≥100 mg；剔除非研究所需的组织类型（比如结缔组织和脂肪组织等）；
B.迅速用预冷的无菌 PBS 溶液或生理盐水将组织表面的残留血液冲洗干净；
C.如果组织体积较大，应尽量将组织切成长宽高均≤0.5cm 的小块（即黄豆大小），多管保存；
D.将处理好的组织样本保存于无菌的 1.5 ml EP 管或旋盖冻存管中；
E.迅速置于液氮中冷冻 3-4 小时以上，然后转移至-80°C 或液氮中长期保存。
F.运送方式：干冰运输。
外泌体样品
外泌体样本需客户自己提取，本公司不包含提取服务
A.将提取好的外泌体样本保存于无菌的 1.5 ml EP 管或2ml研磨管中
B.提取好的外泌体，浓度1ug/ul以上，体积要求至少20ul/指标。
C.WB检测（1-4个指标）：送样量≥100ul
D.WB检测（5-10个指标）：送样量≥300ul
E.置于-80°C 保存
F.运送方式：干冰运输
IP样品
A.新鲜组织，100mg以上，细胞量要求1×107以上，收集细胞沉淀，
.抗体要求为IP级别;
IP抗体必须由客户提供，公司不提供抗体。
置于-80°C 保存；.运送方式：干冰运输
CO-IP样品
新鲜组织，100mg以上，细胞量要求1x10 的7次方以上，收集细胞沉淀，
B.抗体要求为IP级别; 且IP和IB的抗体不能同种属来源：
C.COIP抗体必须由客户提供，公司不提供抗体。
需要提供两只抗体 一只IP级用来沉淀，另一只检测抗体IB可以做WB（如果两支抗体双向验证需要两支抗体都是IP级别）
置于-80°C 保存；.运送方式：干冰运输
植物组织样品：所需样本量≥100 mg
植物样本需额外提供一抗二抗
取得待测植物样品后，用蒸馏水把泥土漂洗干净，用滤纸把多余水分吸取干净。
B.分装成合适大小保存于无菌的 1.5 ml EP 管或旋盖冻存管中；
C.然后转移至-80°C 或者液氮中保存，在避免冻融的情况一般保存1年，建议尽快检测。
D.运送方式：干冰运输。
请您确认以上信息无误，在实验开始后如有更改概不负责，若您在实验开始前有需要请及时与我们联系。本公司将积极配合您对实验的要求，本公司承诺实验结果真实可靠，若您对实验结果存有疑问，请在一个月内及时回复我们。本公司还将您的实验产品（标本及已提蛋白）在实验完成后，保存三个月，在以上规定期限内，本公司将积极配合您对实验结果的复核,若超过以上期限，本公司将不再承担责任和义务。
衷心感谢您对武汉皮诺飞的信任，祝您实验顺利！
