实验技巧
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刚果红染色

刚果红染色是什么?

Congo Red, Amyloid fibril-binding dye(刚果红)是一种偶氮染料。刚果红 (CR) 结合被用作组织切片中淀粉样蛋白存在的诊断测试。刚果红组织化学染色可作为一种简单的筛选工具,用于研究突变细胞中的聚集体是否具有错误折叠的 β 折叠片二级结构。


实验原理

淀粉样蛋白对刚果红有选择性亲和力,因此容易着染。刚果红是一种分子为长线状的偶氮染料,其上的氨基容易与淀粉样蛋白的羟基结合,从而使淀粉样物质染成红色。该染色法性能稳定,是一种经典的淀粉样物质染色方法。



染色应用

淀粉样蛋白对刚果红有选择性亲和力,因此容易着染。刚果红是一种分子为长线状的偶氮染料,其上的氨基容易与淀粉样蛋白的羟基结合,从而使淀粉样物质染成红色。该染色法性能稳定,是一种经典的淀粉样物质染色方法。


实验步骤

1、切片脱蜡至水,入刚果红染液浸染一夜,自来水洗

2、用 0.2% 的 KOH 溶液快速分化 1s,即刻水洗终止分化,镜检,可反复分化水洗,至阳性斑块呈淡粉色或橘红

3、切片入苏木素浸染 30s,分化返蓝,自来水洗。

4、切片依次入 3 缸无水乙醇脱水,各 5min,二甲苯透明 5min,中性树胶封片。



染色结果判读

淀粉样变斑块呈淡粉色或橘红色云朵状或片块状,细胞核呈浅蓝色


送样运输要求

1、样本放置于10倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输(勿冷冻结冰)。

2、石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。



实验例图
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脑-刚果红染色